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為什么STR鑒定對于ATCC細胞系來說很重要

原載自:niangtai.cn[技術資料頻道]  2021-05-17  瀏覽次數(shù):2358

   ATCC 成立于 1925 年,是大的生物資源中心,由美國 14 家生化、醫(yī)學類行業(yè)協(xié)會組成的理事會負責管理,是一家全球性、非盈利生物標準品資源中心。
  進行細胞系STR鑒定是很重要的。很多生物醫(yī)藥的研究都采用培養(yǎng)細胞來進行,這些細胞可能是受贈于其它研究人員,也可能是從細胞庫(如美國?ATCC,American?Type?Culture?Collection)得來。據(jù)估計,15-20%的實驗室,實驗中所使用的細胞已經(jīng)不是原來的細胞系,或者與其它細胞系發(fā)生了交叉污染。顯然,細胞系遭到污染、特征鑒別錯誤,將會極大的威脅著基于這些細胞而發(fā)表的論文質量和研究發(fā)現(xiàn)的正確性。為此,很多細胞庫現(xiàn)在都要對提交來的細胞系進行鑒定,并對細胞系之間的交叉污染進行監(jiān)測。
  現(xiàn)在很多機構都已經(jīng)認識到這個的重要性,ATCC和FDA,這些機構要求對用于制藥領域的實驗中所使用的材料?—?諸如細胞系?—?應該進行“身份鑒定”和純度測試。很多雜志也要求使用細胞系的文章提供STR指紋圖譜數(shù)據(jù)。
  FDA建議研究人員在培養(yǎng)細胞的較早階段(細胞培養(yǎng)第一周)來鑒定細胞系的身份。細胞在被凍存前應再一次進行鑒定;對于活躍生長的細胞,每兩個月應鑒定一次;文獻發(fā)表前也應對細胞系身份進行鑒定。
  細胞如何運輸?收到細胞后如何處理?
  從美國運輸過來的原裝 ATCC 細胞都是冰凍形式,采用干冰運輸?shù)姆绞?。在收到凍存細胞后,很重要的一點是迅速復蘇。
  如果做不到立即復蘇,需將細胞存儲在液氮中。請不要將細胞存放在 -80 ℃ 冰箱,這會使細胞存活率迅速下降。
  使用什么培養(yǎng)基?
  復蘇細胞時需要準備合適的培養(yǎng)基,血清和細胞生長所需的添加劑。雖然大多數(shù)細胞系可以在不止一種培養(yǎng)基中生長,但是當培養(yǎng)基改變時,細胞的性質也會變化。
  另外,有的培養(yǎng)基如 DMEM,各廠商提供產(chǎn)品雖然名稱相同,但成分也會有差異。為了保證細胞最大的復蘇率和維持細胞特性,建議購買細胞的時候,同時購買 ATCC 的培養(yǎng)基(見產(chǎn)品信息說明書和 ATCC 網(wǎng)站)。
  收到細胞后為什么沒有說明書?
  為了響應環(huán)保號召,以及保證信息的快速更新。ATCC 細胞株寄送時沒有隨貨附帶紙質版說明書。
  ATCC細胞系說明書有關于細胞復蘇和傳代的詳細步驟。除說明書外,還有另外一份重要文件——COA(Certificate of Analysis)。COA 中包含具體批次信息,如每管細胞的數(shù)量,建議復蘇使用的培養(yǎng)基用量,已知細胞的傳代代次等重要信息。

 

 

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