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技術(shù)文章 / article
細(xì)胞株購買以及真假鑒別雜談
原載自:www.niangtai.cn[技術(shù)資料頻道] 2016-05-24 瀏覽次數(shù):2424
細(xì)胞株購買以及真假鑒別雜談
細(xì)胞株是廣大的科研工作者和用戶常用的實驗室試劑耗材,可是市場上通常會有假冒偽劣細(xì)胞株,嚴(yán)重擾亂市場秩序。如何鑒別細(xì)胞株的真?zhèn)危?/div>
近來,許多客戶向我們反映一些唯利是圖的公司和小作坊,用假冒偽劣的細(xì)胞株坑害廣大的科研工作者,嚴(yán)重擾亂了科研工作,嚴(yán)重擾亂了市場秩序,我們有義務(wù),有責(zé)任揭露這些作偽造假者制作假冒偽劣細(xì)胞株的手法,同時提供如何鑒別這些假冒偽劣細(xì)胞株的方法,供廣大的科研工作者和用戶參考,讓那些掛羊頭賣狗肉,冒牌進(jìn)口試劑,以及全無誠信,作假造偽者,如過街之鼠,人人喊打。
某些奸商在國外注冊公司,國內(nèi)生產(chǎn),隱瞞生產(chǎn)產(chǎn)地,明明是國產(chǎn)試劑卻宣稱國外進(jìn)口虛報高價,欺騙廣大用戶;或是仿冒進(jìn)口細(xì)胞株,使得進(jìn)口分裝ELISA質(zhì)量參差不齊,魚龍混雜,很多都是經(jīng)小作坊粗劣加工而成。有些為了夸大其生產(chǎn)ELISA涵蓋的指標(biāo)的范圍,甚至用一種指標(biāo)來冒充其它指標(biāo),造成各種種屬、各種指標(biāo)都可以做的假象。比如用TGFβ這樣的指標(biāo)代替大多數(shù)試劑盒的其他指標(biāo)作為檢測抗體,同樣可以獲得良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。因為TGFβ在大多數(shù)哺乳類動物中(人、大鼠、小鼠、豬、牛……)都有廣泛表達(dá),種屬間抗原的氨基酸序列同源性達(dá)100%,TGFβ隨著其他因子的影響,其表達(dá)水平也會發(fā)生相應(yīng)的變化,一般客戶很難察覺,因此這樣的惡性造假行為使得消費(fèi)者被動造假,后果極其嚴(yán)重,因此善意提醒客戶警惕此類作假試劑盒!
鑒別細(xì)胞株真?zhèn)蔚姆椒ǎ?/div>
一.利用干擾實驗即可辨別細(xì)胞株是否檢測目的抗原,方法如下:
(1) 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液(2) 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體(3) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物(4) 實驗完畢后,檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造細(xì)胞株。 (5) 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。
二. 如果購買了兩盒同一公司的細(xì)胞株A和B,利用交叉實驗即可辨別細(xì)胞株是否造假,方法如下:
(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
(2) 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物。
(5) 實驗完畢后,檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個細(xì)胞株檢測的同一個指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造細(xì)胞株。
(6) 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個細(xì)胞株檢測的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的細(xì)胞株。
如何鑒別假冒偽劣細(xì)胞株,另外,大家還可以將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”關(guān)鍵詞在google上搜索,各類論壇的用戶會將該細(xì)胞株的質(zhì)量和效果,是否偽劣一一有所討論;或者直接打給生產(chǎn)廠商,詢問他們試劑盒抗原和抗體的來源,索要試劑盒說明書,然后利用網(wǎng)絡(luò)確認(rèn)這些信息,正規(guī)的ELISA生產(chǎn)商,這些信息都是非常齊全,如果信息不全,則該ELISA的制造水平和質(zhì)量都會很差。