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ATCC細(xì)胞株購買運(yùn)輸是關(guān)鍵
原載自:www.niangtai.cn[行情動(dòng)態(tài)] 2021-05-25 瀏覽次數(shù):1126
ATCC細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講,可培養(yǎng)到40-50代。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
ATCC細(xì)胞株的配制
(1)稱量和熬煮
按細(xì)胞株配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。
(2)加熱溶解
把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂*溶解后,再補(bǔ)充水分至所需量。
(3)分裝
按實(shí)訓(xùn)要求,將配制的細(xì)胞株分裝入試管或500ml三角瓶內(nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使細(xì)胞株沾在管口或瓶口上造成污染。
分裝量:ATCC細(xì)胞株約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶內(nèi)以不超過其容積的一半為宜;半固體細(xì)胞株以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。
(4)加棉塞
細(xì)胞株分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進(jìn)入細(xì)胞株內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能。
(5)包扎
加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道線繩或橡皮筋扎好,用記號筆注明細(xì)胞株名稱、組別、配制日期。
購買國外ATCC細(xì)胞株應(yīng)該注意的事項(xiàng)
由于現(xiàn)在國內(nèi)的細(xì)胞庫資料不是很充足,而且比較零散,包括建株時(shí)的技術(shù)層面不一,沒有比較嚴(yán)格統(tǒng)一的操作規(guī)范,所以在遇到比較重要的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目時(shí),一般都比較傾向于購買國外的ATCC細(xì)胞株,但購買國外ATCC細(xì)胞株需要考慮的因素有如下幾點(diǎn):
1、ATCC細(xì)胞株的生物等級,由于有些ATCC細(xì)胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。
2、在購買國外ATCC細(xì)胞株時(shí),需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上,采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。
3、報(bào)關(guān)時(shí)盡量提供比較充足的證明材料,以免擔(dān)擱時(shí)間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完ATCC細(xì)胞株死亡,甚至于被退回給發(fā)貨人。
4、如果通過國外ATCC細(xì)胞株在國內(nèi)的代理商購買的話,合同中需注明以下一些內(nèi)容:
a.明確的到貨時(shí)間,這個(gè)時(shí)間需注明的是工作日,還是普通日。
b.采用什么樣的運(yùn)輸方法?
c.如果屬于技術(shù)外的因素而ATCC細(xì)胞株無法培養(yǎng)活,供方需負(fù)什么樣的責(zé)任?
d.ATCC細(xì)胞株的詳細(xì)資料,以及ATCC細(xì)胞株的代數(shù),其中,ATCC的ATCC細(xì)胞株一般都在幾十代,這個(gè)需要與國外確認(rèn),IST-Banca可與他們的代理商索取詳細(xì)資料!
e.需在合同中注明*,避免相關(guān)公司魚龍渾雜,從國外購買回一株ATCC細(xì)胞株,經(jīng)過培養(yǎng)傳代后,同時(shí)供應(yīng)給幾個(gè)人;一般國外進(jìn)口的ATCC細(xì)胞株都會有原裝的凍存管,而且每一支凍存管上都會有批號,而且每次的批號都不一樣。
f.在決定購買ATCC細(xì)胞株之前,必須仔細(xì)閱讀他們的培養(yǎng)信息,所謂“ATCC細(xì)胞株未到,培養(yǎng)基先行一步”。
g.在接到ATCC細(xì)胞株后,要求供應(yīng)公司的人員現(xiàn)場參與,從而用于確認(rèn)責(zé)任。
h.在培養(yǎng)前,請確認(rèn)您的二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳濃度的準(zhǔn)確
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