ATCC細(xì)胞株溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2小時(shí)，產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度?？乖贵w反應(yīng)4℃更為*，在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過(guò)*，以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng)，在ELISA試劑盒中一般不予采用。

　　怎樣才能知道我購(gòu)買(mǎi)的ATCC細(xì)胞株質(zhì)量怎么樣、是否為偽劣產(chǎn)品？現(xiàn)在市場(chǎng)上有很多利用偽劣細(xì)胞株坑害科研工作者，唯利是圖，直接無(wú)視科學(xué)研究的嚴(yán)謹(jǐn)性。那么我們要如何去判斷一個(gè)ATCC細(xì)胞株產(chǎn)品的質(zhì)量呢？下面一起來(lái)看看細(xì)胞株內(nèi)在質(zhì)量檢測(cè)方法大曝光！

　　*、利用干擾實(shí)驗(yàn)即可辨別ATCC細(xì)胞株是否檢測(cè)目的抗原具體方法如下：

　　1.將針對(duì)細(xì)胞株特異性的重組蛋白抗原和細(xì)胞株中的檢測(cè)抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液2.37℃孵育15分鐘后，ATCC細(xì)胞株代替原細(xì)胞株3.后續(xù)操作按照ATCC細(xì)胞株說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物4.實(shí)驗(yàn)完畢后，檢測(cè)其標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，如果標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)良好則說(shuō)明加入的目的抗原和細(xì)胞株抗體不匹配，細(xì)胞株檢測(cè)抗體針對(duì)的是非目的抗原，ATCC細(xì)胞株該細(xì)胞株為偽劣假造細(xì)胞株。

　　5.如果標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)線(xiàn)性，則說(shuō)明細(xì)胞株檢測(cè)抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實(shí)際細(xì)胞株抗體的檢測(cè)作用，則該細(xì)胞株檢測(cè)抗體針對(duì)的是目的抗原。

　　ATCC細(xì)胞株濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。無(wú)論是水浴還是濕盒溫育，反應(yīng)板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng)，操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書(shū)的要求控制溫育。ATCC細(xì)胞株室溫溫育時(shí)，只要平置于操作臺(tái)上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn)，一個(gè)人操作時(shí)，一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定。

 

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