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新聞動態(tài) / news
一個好的ATCC細胞株有多方面要求
原載自:www.niangtai.cn[行情動態(tài)] 2017-09-07 瀏覽次數(shù):1465
ATCC細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。ATCC細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細胞系(cell line), 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱為有限細胞系(finite cell line), 如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱為連續(xù)細胞系(continuous cell line), 培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。 所以ATCC細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標志的培養(yǎng)細胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講,可培養(yǎng)到40-50代。ATCC細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
購買國外ATCC細胞株需要考慮的因素有如下幾點:
1、ATCC細胞株的生物等級,由于有些ATCC細胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。
2、在購買國外ATCC細胞株時,需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上),采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。
3、報關時盡量提供比較充足的證明材料,以免擔擱時間而導致干冰揮發(fā)完ATCC細胞株死亡,甚至于被退回給發(fā)貨人。
4、如果通過國外ATCC細胞株在國內(nèi)的代理商購買的話,合同中需注明以下一些內(nèi)容:
a.明確的到貨時間,這個時間需注明的是工作日,還是普通日。
b.采用什么樣的運輸方法?
c.如果屬于技術外的因素而ATCC細胞株無法培養(yǎng)活,供方需負什么樣的責任?
d.ATCC細胞株的詳細資料,以及ATCC細胞株的代數(shù),其中,ATCC的ATCC細胞株一般都在幾十代,這個需要與國外確認,IST-Banca可與他們的代理商索取詳細資料。
e.需在合同中注明*,避免相關公司魚龍渾雜,從國外購買回一株ATCC細胞株,經(jīng)過培養(yǎng)傳代后,同時供應給幾個人;一般國外進口的ATCC細胞株都會有原裝的凍存管,而且每一支凍存管上都會有批號,而且每次的批號都不一樣。
f.在決定購買ATCC細胞株之前,必須仔細閱讀他們的培養(yǎng)信息,所謂“ATCC細胞株未到,培養(yǎng)基先行一步”。
g.在接到ATCC細胞株后,要求供應公司的人員現(xiàn)場參與,從而用于確認責任。
h.在培養(yǎng)前,請確認您的二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳濃度的準確性,國外的ATCC細胞株建議用進口的細胞培養(yǎng)瓶,比如:Fisher,corning,falcon品牌的培養(yǎng)瓶。
i.詢問你的代理商或者經(jīng)銷商,接到ATCC細胞株后是否需要離心置換出DMSO,因為有些細胞廠家建議不要離心,他們會認為離心而導致的碎片比DMSO產(chǎn)生毒性的害處更大,如果可以離心,轉速不要過高,一般都在1000轉以下,此處需要注意,因為有的公司會拿這一點來拒絕索賠。
j.培養(yǎng)基的服務,仔細與供應商確認培養(yǎng)基的品牌及份量,以免供應商以些理由來推翻你索賠的理由。
k.在ATCC細胞株復蘇時,一定要先想好步驟再做,一步一步來做,避免導致操作中的污染,復蘇是一個非常重要的步驟,往往容易導致污染,然后為污染所導致的雜質(zhì)而傷透腦筋。
一個好的ATCC細胞株有多方面要求:
1. 產(chǎn)量高,高的產(chǎn)量直接降低固定投資和單次生產(chǎn)成本。
2. 產(chǎn)品質(zhì)量符合要求。產(chǎn)品質(zhì)量影響藥效和安全性。
3. 穩(wěn)定性。產(chǎn)量和質(zhì)量在生產(chǎn)傳代過程中不應有大的改變。一般認為在60-90PDL產(chǎn)量變化不超過30%是可以接受的。
4. 與生產(chǎn)過程的相容性。ATCC細胞株需要適合大規(guī)模生產(chǎn)放大。
5. 合規(guī)。ATCC細胞株的構建過程應避免接觸或使用動物來源成分或其它可能影響安全性的成分,保證單克隆性(clonality)以及整個過程的實驗記錄完整。
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